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      小鼠雜交瘤細胞;IE3A10C8E5培養步驟

      日期:2022-05-26瀏覽:1507次

      小鼠雜交瘤細胞;IE3A10C8E5培養步驟:

      1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

      2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

      1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

      1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止消化。

      3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

      4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。

      2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

      方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。

      方法三:可選擇半數換液方式,棄半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。

      1)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。棄培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數量加入到凍存液中。

      細胞纖毛內轉運同源蛋白172抗體

      絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ICK抗體

      肽酰tRNA水解酶ICT1抗體

      alpha干擾素誘導蛋白27抗體

      細胞纖毛內轉運同源蛋白81抗體

      Gamma干擾素誘導蛋白16抗體

      異檸檬酸脫氫酶3 beta亞基抗體

      干擾素誘導的三角形四肽重復蛋白1抗體

      異檸檬酸脫氫酶gamma亞基抗體

      Bipped B樣蛋白抗體

      艾杜糖-2-硫酸酯酶抗體

      α-L-艾杜糖苷酶抗體

      細胞纖毛內轉運同源蛋白122抗體

      細胞纖毛內轉運同源蛋白140抗體

      細胞纖毛內轉運同源蛋白20抗體

      細胞纖毛內轉運同源蛋白43抗體

      細胞纖毛內轉運同源蛋白80抗體

      CD101抗體


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