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      基礎(chǔ)信息Product information
      產(chǎn)品名稱:

      兔腸平滑肌細(xì)胞

      產(chǎn)品簡介:

      兔腸平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 TUHR10TKB人腎癌細(xì)胞 SKT蛋白抗體 HHCC (人肝癌細(xì)胞) B淋巴細(xì)胞基因1抗體 MEL(小鼠紅白血病細(xì)胞) 核糖體蛋白L23A抗體 鋅指蛋白ZZEF1抗體

      產(chǎn)品型號:

      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

      訪問量:1345

      更新時間:2025-04-09

      產(chǎn)品特性Product characteristics

      兔腸平滑肌細(xì)胞

      兔腸平滑肌細(xì)胞

      商品屬性:

      組織來源

      產(chǎn)品規(guī)格

      細(xì)胞形態(tài)

      貨號

      5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

      成纖維細(xì)胞樣

      YS-01X8330

      細(xì)胞簡介:

      兔腸平滑肌分離自腸組織;不區(qū)分大腸、小腸等;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動的動力,促使食物向下運(yùn)動。小腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤,是小腸結(jié)締組織惡性腫瘤中常見的一種。因此,體外小腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎(chǔ)和前提。此外,體外培養(yǎng)細(xì)胞,由于影響因素較為單一,是研究細(xì)胞功能以及相應(yīng)的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的基礎(chǔ)。

      方法簡介:

      實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

      質(zhì)量檢測:

      實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

      培養(yǎng)信息:

      培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      換液頻率:每2-3天換液一次

      生長特性:貼壁

      細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

      傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

      消化液:0.25%

      培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO25%

      兔腸平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

      兔腸平滑肌細(xì)胞

      細(xì)胞傳代及凍存:

      細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
      如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

      原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

        ① 組織塊培養(yǎng)法

        組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

        ② 消化培養(yǎng)法

        ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

        對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

        ④器官培養(yǎng)

        器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

      兔腸平滑肌細(xì)胞


      公司正在出售的產(chǎn)品:

      異基-β-D-硫代半乳糖苷   10g

      IPTG,DioxaneFree   100g

      磺酸 SHES   25g

      Isicacidsodiumsalt   100g

      羊孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒

      Human ai lymphocyte aibody (ALA/LCA) ELISA Kit 人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)試劑盒

      HumanVitaminD2,VD2ELISAKit D2(VD2)試劑盒 進(jìn)口分裝

      CLIAKitforADH(Humanalcoholdehydrogenase)ELISAKit人乙醇脫氫酶

      血液游離氨基酸含量比色法定量試劑盒20

      MouseQalymphocyteaigen2region,Qa-2ELISAKit小鼠Qa淋巴細(xì)胞抗原2(Qa-2)試劑盒

      SLFNL1抗體

      細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白1抗體

      CSNK2A1重組小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 Protein

      S轉(zhuǎn)移酶κ1(GSTκ1)重組蛋白 Recombinant Glutathione S Transferase Kappa 1 (GSTk1)

      PLBD2重組人 PLBD2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

      CA4 Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

      ERBB3 Protein Rhesus 重組恒河猴 HER3 / ErbB3 蛋白

      白介素12B(IL12B)重組蛋白 Recombinant Interleukin 12B (IL12B)

      CA4 Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

      NGFR重組小鼠 NGFR / P75 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

      PTGFRN Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 蛋白 (His 標(biāo)簽)

      UBASH3B重組人 UBASH3B / Sts1 / TULA-2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

      兔腸平滑肌細(xì)胞大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 ,英文名: Aβ1-42 ELISA Kit

      Rabbit Endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 兔子內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒

      ELISA 小鼠食欲素A(mouse Orexin A)  進(jìn)口分裝

      CLIAKitforIL-1(MouseIerleukin1)ELISAKit小鼠白介素1

      通用型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形態(tài)染色試劑盒100

      ELISAKitVEGF大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子

      原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

        一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

        1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

        2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

        3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

        4、 胎牛血清濃度為10%-80%

        5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

        6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

        7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

        8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

        二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

        1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

        2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

        3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

        4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

        5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

        6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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