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基礎信息Product information
產品名稱：
大鼠胚胎干細胞
產品簡介：
大鼠胚胎干細胞公司正在出售的產品：Beta氨基己糖苷酶beta亞基蛋白A鏈抗體 惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體 NPIP樣蛋白1抗體 大鼠臍靜脈平滑肌細胞 小鼠前列腺成纖維細胞 人尤文氏肉瘤細胞;TC-32 VE (人血管內皮細胞)
產品型號：
廠商性質：經銷商
訪問量：453
更新時間：2025-04-09
產品特性Product characteristics
大鼠胚胎干細胞
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
囊胚 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 短梭形、多角形 | YS-01X7741 |
細胞簡介：
大鼠胚胎干分離自囊胚胚胎組織；胚胎干細胞（Embryonic stem cell，ESCs，簡稱ES、EK或ESC細胞）是早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來的一類細胞，它具有體外培養無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內環境，ES細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型。進一步說，胚胎干細胞（ES細胞）是一種高度未分化細胞。它具有發育的全能性，能分化出成體動物的所有組織和器官，包括生殖細胞。ES細胞具有與早期胚胎細胞相似的形態結構，細胞核大，有一個或幾個核仁，胞核中多為常染色質，胞質胞漿少，結構簡單。體外培養時，細胞排列緊密，呈集落狀生長。用堿性磷酸酶染色，ES細胞呈棕紅色，而周圍的成纖維細胞呈淡黃色。細胞克隆和周圍存在明顯界限，形成的克隆細胞彼此界限不清，細胞表面有折光較強的脂狀小滴。細胞克隆形態多樣，多數呈島狀或巢狀。小鼠ES細胞的直徑7 微米～18 微米，豬、牛、羊ES細胞的顏色較深，直徑12 微米～18 微米。胚胎干細胞與普通細胞有顯著差別，有其特定的生長特性和特定的標志，例如堿性磷酸酶活性非常高，帶有胚胎階段特異性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA），人類胚胎干細胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等標志，這些特性和標志均可以用于對胚胎干細胞進行鑒定，除此之外，胚胎干細胞還可以在體外傳代，并保持正常核型。在體外培養體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纖維細胞飼養層（MEF）上培養時，胚胎干細胞都能呈克隆性增殖，長期保持核型正常和穩定，凍存解凍也不影響不分化的特性。另外，胚胎干細胞還表現岀高水平端粒酶活性，目前證明端粒酶與細胞衰老密切相關，多數成熟細胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細胞與成熟細胞不同的重要特點，也可能是其復制生命期限遠比體細胞長的原因。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠胚胎干采用分離囊胚組織，去除胚胎透明帶、使用特制專用培養基篩選培養，消化傳代純化制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠胚胎干經Oct-4免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 明膠（0.1%）
培養基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長特性 貼壁
細胞形態 短梭形、多角形
傳代特性 可傳5-8代左右
消化液 0.025%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
小鼠纖維連接蛋白 英文名稱： Fibronectin 規格： 英文縮寫： FN
FMS樣酪酸激酶 英文名稱： Fms-related tyrosine kinase-3 規格： 英文縮寫： Flt3
小鼠Flt3配體 英文名稱： Fms-related tyrosine kinase-3 Ligand 規格： 英文縮寫： Flt3 Ligand
小鼠纖維連接蛋白 英文名稱： fibronecti 規格： 英文縮寫： FN
小鼠胃泌酸調節素(OXM)試劑盒 96T/48T
Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit 人0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)試劑盒
Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit 人堿性0酸酶(ALP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenIerleukin1,IL-1試劑盒雞白介素1(IL-1)試劑盒規格：96T/48T
載玻片細胞ERK蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒規格：96T/48T
PE標記人CD18單克隆抗體
酪激酶A/B/C重組兔單克隆抗體
PTPN11重組小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein
泛素(Ub)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)
PRKAR1A重組人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein
CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)
EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白
轉鐵蛋白受體(TFR)天然蛋白 Native Transferrin Receptor (TFR)
CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)
CD6重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白 Protein
PRLR Protein Rat 重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白
CCL1重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 Protein
大鼠胚胎干細胞兔子內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒
People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)試劑盒E
Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humandynorphin,Dyn試劑盒人強啡肽(Dyn)試劑盒規格：96T/48T
組織P38a激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒規格：96T/48T
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
