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      基礎(chǔ)信息Product information
      產(chǎn)品名稱:

      人結(jié)腸黏膜上皮細胞

      產(chǎn)品簡介:

      人結(jié)腸黏膜上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:肌動蛋白結(jié)合蛋白IPP抗體 FAM59A蛋白抗體 紅細胞膜蛋白4.2抗體 人顱蓋造骨細胞 兔乳腺成纖維細胞 VM-CUB-1人膀胱癌細胞 D341Med(人髓母細胞瘤細胞)

      產(chǎn)品型號:

      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

      訪問量:612

      更新時間:2025-04-09

      產(chǎn)品特性Product characteristics

      人結(jié)腸黏膜上皮細胞

      人結(jié)腸黏膜上皮細胞

      商品屬性:

      組織來源

      產(chǎn)品規(guī)格

      細胞形態(tài)

      貨號

      結(jié)腸組織

      5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

      上皮細胞樣

      YS-01X7160

      細胞簡介:

      人結(jié)腸黏膜上皮分離自結(jié)腸組織;結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結(jié)締組織),肌層(內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑肌),外膜(纖維膜或漿膜)。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強度。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養(yǎng)方法,為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細胞模型。

      方法簡介:

      公司實驗室分離的人結(jié)腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      質(zhì)量檢測:

      公司實驗室分離的人結(jié)腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      培養(yǎng)信息:

      包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

      培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      換液頻率 每2-3天換液一次

      生長特性 貼壁

      細胞形態(tài) 上皮細胞樣

      傳代特性 可傳2-3

      消化液 0.25%

      培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO25%

      人結(jié)腸黏膜上皮細胞

      細胞傳代及凍存:

      細胞傳代步驟細胞凍存步驟
      如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

      原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

        ① 組織塊培養(yǎng)法

        組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

        ② 消化培養(yǎng)法

        ③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

        對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

        ④器官培養(yǎng)

        器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

      人結(jié)腸黏膜上皮細胞


      公司正在出售的產(chǎn)品:

      小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

      小鼠血小板活化因子(PAF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

      小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

      小鼠肌球蛋白(MYS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

      小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)ELISA 試劑盒 96T/48T

      Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干細胞因子受體(SCFR)試劑盒

      Humanchondroitinsulfate,CSELISAKit (CS)試劑盒 96T/48T 進口分裝

      Chicken17-ketosteroids,17-KS試劑盒雞17-同類固醇(17-KS)試劑盒規(guī)格:96T/48T

      遠西方雜交(FARWESTERNBLOT)印跡消除試劑盒20

      Mousehypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒規(guī)格:96T/48T

      醇結(jié)合蛋白4抗體

      AF680標記的山羊抗人乙肝表面抗原抗體

      EFNA1重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

      ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2 0.5mgASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原

      NEIL1重組人 NEIL1 蛋白 Protein

      CD63 Protein Human 重組人 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白

      THY1 Protein Rat 重組大鼠 CD90 / THY-1 蛋白

      ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2 0.5mgASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原

      CD63 Protein Human 重組人 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白

      EFNA1重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

      THY1 Protein Rat 重組大鼠 CD90 / THY-1 蛋白

      NEIL1重組人 NEIL1 蛋白 Protein

      人結(jié)腸黏膜上皮細胞大鼠心肽(ANP)試劑盒 ,英文名: ANP ELISA Kit

      Pla vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 植物B12(VB12)試劑盒

      Mouseplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

      CLIAKitforHumanai-IVIgGaibodyELISAKit人抗IVIgG抗體

      細胞GRK4α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

      ELISAKitCRH大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素

      原代細胞的培養(yǎng)條件:

        一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

        1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

        2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

        3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

        4、 胎牛血清濃度為10%-80%

        5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

        6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;

        7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

        8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

        二、懸浮細胞培養(yǎng)

        1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

        2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

        3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

        4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

        5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

        6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。


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